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我们有一个质粒,他含有终止密码子,教授要我对其设计引物然后做PCR,并对PCR产物进行双酶切,但我不知道?
我们有一个质粒,他含有终止密码子,教授要我对其设计引物然后做PCR,并对PCR产物进行双酶切,但我不知道?
浏览次数:2265
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时间:2024-05-18
热门回答
2024-05-11
大宝儿0619
而已扩增的目的片段里没有)在你PCR引物上正向和反向序列前各添加一个酶切位点(既然是双酶切那这两个酶应该不一样。pcr后连T载体再酶切回收。同时用同样的酶对你的载体酶切并回收,同时注意移码的问题,再将两者相连。
你说到的去除终止密码子,应该是指的你的目的片段上的,且这两个酶切位点是你要用的载体上也存在的
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15
2024-05-14
爱家酒店
PCR扩增的是片段,切掉了这个基因就会一直转录下去,要看让你设计什么样子的引物,终止密码子一般是不能切掉的,引物包含双酶切位点这个你要问问你的教授是想干什么用,合成的蛋白就不是以前的蛋白了
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