斑马鱼基因组大小怎样比较?

选用GFP或RFP来比较

采用显微注射和电脉冲导入法

鱼类的染色体(基因组)DNA作为遗传物质的载体,每个细胞中的DNA含量是基本恒定不变的。因此,DNA含量可以反映一个物种的基因组种质特征,例如基因组大小、非编码区的相对比例等。20世纪70年代开始有利用流式细胞计量术(Flowcytometry)测定鱼类细胞DNA含量的报道
[6]
1　材料与方法
111　材料鱼　稀有　鲫野生群体由本所鱼类室提供。青　
为武汉本地野生种,在实验室经过繁殖而保存。斑马鱼购于武汉市花鸟市场,经过实验室多代繁殖而保存。
112　方法　选取健康的个体,在室内水族箱暂养1周以上。
由于三种鱼类体形都较小,取血困难,本文采用剪断尾柄的方法直接将微量全血收集于含1%肝素钠的冷生理盐水中,低速离心(300r/min,8min),弃上清液,PBS洗涤红细胞2次,
70%乙醇固定(4℃过夜),0.5%胃蛋白酶(0.1mol/LHCl)重
悬红细胞,室温温育15min并轻轻震动。用微量吸液器取少量精液,PBS洗涤1次,余下的处理方法与红细胞相同。PIμ染色0.5h,细胞悬液经过50m尼龙网过滤后,在Beckman公司CoulterEpicsAltra型流式细胞仪上测出相对DNA含量。
每个样本稳定计数至少15000个细胞。本文以鸡红细胞DNA含量为参照。鸡血细胞是国际上公认的对照标准[7],但其DNA含量又与稀有　鲫的含量十分接近,因此,本研究采用内定标或外定标。内定标是将鸡血细胞处理后按照鸡、鱼血细胞约1∶3比例混合后上机测定;外定标则是流式细胞仪开机稳定后首先测定1次对照鸡血样品,在每测定4—5个左右鱼样品后再测定1次鸡血样,如果两次鸡血样的数据无误差,则数据可靠,否则,重新测定。